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江苏省卫生厅关于印发江苏省突发人间禽流感疫情应急预案和有关技术方案的通知

  一、人间禽流感病毒实验室安全
  人间禽流感病毒检测实验室的生物安全应按微生物生物安全分类要求在P3级实验室进行。
  二、标本的采集、运送
  1、采集标本的种类:疑似禽流感患者的咽、鼻拭子或含漱液、血液以及死亡病例的尸检组织。
  2、采集标本时间:用于分离病毒的标本应为发病2~3天,最好不超过7天。用于血清检测的标本应采集急性期和恢复期的双份血液。急性期尽早采集,最迟不超过发病后7天,恢复期血清应在发病后14天后采集。
  3、标本的运送:参照中国疾病预防控制中心关于SARS标本运送要求。
  4、采集时的防护:疑似病例的标本应参照SARS标本采集求。
  三、检测程序
  1、疑似病例咽拭子或含漱液、鼻拭子和尸检组织
  (1)病毒分离、鉴定
  用组织培养和鸡胚分离法。具体方法同常规人流感检测,详见《全国流行性感冒监测方案(试行)》(中疾控发[2003]445号)附件。不同的是鸡胚接种一定要用SPF鸡胚。
  鸡胚或细胞培养物进一步用HA和HI试验鉴定,方法见(中疾控发[2003]445号)附件。试验试剂用WHO提供的试剂盒。
  经HI试验H5抗体阳性者报送国家流感中心。HA阳性HI试验H5阴性,也送国家流感中心。
  (2)RT-PCR或实时RT-PCR试验
  该方法可作为早期实验室诊断的参考依据。可和病毒分离培养同时进行,帮助早期判定。
  2、疑似病例血清的检测
  (1)感染早期的血清标本
  用于病毒分离培养方法同上。同时要留部分作为双份血清的急性期血清备用。
  (2)感染7天以后的血清标本
  与急性期血清配对同时做HI试验检测,方法见(中疾控发[2003]445号)附件。
  3、常规检测中可疑标本
  在常规流感监测中实验室发现HA阳性而血清H1、H3和B型血清皆不抑制标本,应用H5试剂盒做鉴定。
  四、检测结果
  1、分离到病毒,HI试验H5抗体阳性或同时PCR试验H5阳性,可报禽流感H5型阳性,送国家流感中心复核。
  2、分离到病毒,HI试验H5抗体阴性,PCR试验H5阳性者,原始标本送国家流感中心进一步检测。
  3、恢复期H5抗体较急性期抗体4倍增高,可报禽流感H5型阳性,送国家流感中心复核。


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