(五)脑脊液标本
出现神经系统症状的病例,要采集脑脊液标本,进行病原和抗体检测,从脑脊液中分离病毒也具有很高的诊断价值。采集时间为出现神经系统症状后3天内,采集量为1.0-2.0ml。采集后立即装入无菌带垫圈的冻存管中,4℃暂存立即(12h内)送达实验室,-20℃以下低温冷冻保藏,需长期保存的标本存于-70℃冰箱。
(六)病例密切接触者的标本采集
选择典型病例所在的托幼机构、或所在村,以新发病例密切接触者为采样对象,采集单份粪便和血清标本。
(七)健康对照的标本采集
选择患儿发病所在社区(村)的临近无病例的社区(村)或托幼机构。采集5岁以下的儿童单份粪便和血清标本。
三、标本采集注意事项
在手足口病的实验室诊断中,从疱疹液或脑脊液中分离病毒具有很高的诊断价值,但对于不同血清型的肠道病毒,脑脊液中的病毒分离率是大不相同的。用于采集咽拭子的无菌拭子要放在适当的保存液中,如维持液或生理盐水,以防干燥。用于分子生物学诊断的标本采集与病毒分离标本的采集方法一样。为了保证检测结果的准确性和有效性,标本应在病例发病后尽早采集,尽快检测。不能立即检测的标本应冷冻保存。对于血清学诊断,急性期血清应该在发病后尽早采集,恢复期血清在发病两周后采集。
四、实验室检测方法
(一)生长液、维持液的配制见下表
| 生长液(GM)
| 维持液(MM)
|
Eagle`s液(MEM)
| 86.5ml
| 92.5ml
|
L-谷氨酰胺200mM
| 1.0ml
| 1.0ml
|
胎牛血清
| 10.0ml
| 2.0ml
|
7.5%NaHCO3溶液
| 2.5ml
| 3.5ml
|
P.S溶液*(青霉素及链霉素)
| 1.0ml
| 1.0ml
|
(二)具体检测方法略。
手足口病标本采集登记表
┌──┬───┬───┬─┬──┬─────┬───┬──┬──┬─────┬──┬─────────┐
│编号│姓 名 │家 长 │性│年龄│ 家庭住址 │联 系 │散居│发病│ 临床症状 │采样│ 标本类型 │
│ │ │姓 名 │别│ │ │电 话 │/入 │日期├─┬─┬─┤日期├─┬─┬─┬─┬─┤
│ │ │ │ │ │ │ │托/ │ │发│疱│脑│ │咽│粪│疱│血│脑│
│ │ │ │ │ │ │ │学校│ │热│疹│炎│ │拭│便│疹│液│脊│
│ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │ │子│ │液│ │液│
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