2、确认每份标本至少有3ml。
3、选择脓样、干酪样、粘液分泌物涂抹制备玻片。
4、制备玻片时标本涂抹均匀，不要太厚或太薄。
5、使用高质量染料、严格按照配方配制染液。
6、严格按照操作程序完成染色过程。
7、判断结果为“阴性”前，必须阅读规定要求的视野数。
8、作为对照，可采用已知结果为阳性的玻片，完成染色镜检过程。
9、完整、准确地标注痰盒、玻片和实验室登记本。
10、登记前对检验单和标本盒上的标注进行仔细核对。
11、准确记录和报告结果。
七、痰玻片的保存
（一）镜检后的涂片应及时用浸满二甲苯的擦镜纸彻底去除涂片上的镜油。
（二）再次核对实验室登记本与每张涂片实验序号。
（三）严禁在涂片上标记镜检的阴、阳性结果。
（四）按实验室登记本序号连续排列全部涂片，存放于玻片盒内。
（五）涂片保存与实验室登记本记录应保持一致。初诊病人第一张涂片存入涂片盒后需预留出两个空位置，以备第二张、第三张涂片检查后放入。
（六）保存近期3个月的全部痰涂片待各级实验室质量控制抽检，如果年涂片量不足500张，必须全部保存。
（七）装满涂片的玻片盒，需用标签注明涂片实验序号区间和日期区间，以便日后盲法复检或现场评价时抽样。
八、实验室管理
（一）显微镜日常维护
显微镜作为发现涂片阳性病人的重要设备，实验室工作人员应正确使用并给予正确维护，以保证其正常工作和延长使用寿命。在使用和维护显微镜时应特别遵守下列要点：
1、显微镜应放置在干燥、无尘和通风的环境中。如果显微镜一段时期内停止使用，应拆开并放置在原包装盒内，并放置有效的干燥剂。
2、使用前和使用后必须使用擦镜纸彻底清洁物镜。
3、严禁物镜镜头直接接触玻片上痰膜。
4、使用油镜时，只能使用细螺旋调节焦距。
5、使用电光源显微镜时，注意电压和电流是否与仪器要求相匹配。
（二）耗材供应与管理
为保障痰涂片检查工作能够连续不断开展，应储存一定数量的实验耗材和相应试剂，储备量可根据工作量来进行计算，一般应准备比平均工作量高20％的相应耗材和试剂。染色试剂应由省结核病参比实验室或经省级结核病参比实验室进行了质量控制的地（市）级结核病参比实验室组织统一配制和供应，其它耗材可根据当地情况由省、地或县统一供应。各项物资、耗材按照需要供应，并保证达到质量要求。每个查痰点每检查1000份痰标本所消耗的材料列表如下：
┏━━━━━━━━━━┯━━━━━━━━━┯━━━━━┯━━━━━━━┓
┃ 材料 │用量（每检查1000份│ 试剂名称 │ 用量（每检查 ┃
┃ │ 痰标本） │ │1000份痰标本）┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃ 痰盒 │ 1200个 │石碳酸复红│ 5000ml ┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃ 竹签 │ 1200 个 │ 亚甲基蓝 │ 5000ml ┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃ 载玻片 │ 1200 张 │5%盐酸酒精│ 10000ml ┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃载玻片盒（100张/盒）│ 10个 │ 镜油 │ 110ml ┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃ 初诊病人登记本 │ 1本 │ 二甲苯 │ 110ml ┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃ 实验室登记本 │ 1本 │ 定性滤纸 │ 6张 ┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃ 痰涂片检查单 │ 20本（50张/本） │ 擦镜纸 │ 1本 ┃
┠──────────┼─────────┼─────┼───────┨
┃记号笔（玻璃刻刀或2B│ 2支 │ │ ┃
┃ 铅笔） │ │ │ ┃
┗━━━━━━━━━━┷━━━━━━━━━┷━━━━━┷━━━━━━━┛
