（4）唾液目视观察标本整体外观，以透明或半透明水样、粘度较低的口腔分泌物为主，标本中有时伴有气泡；涂片染色镜检时，镜下可见少量口腔上皮脱落细胞和口腔内寄生菌，有时可见食物残渣。由于此类标本进行抗酸杆菌检查时的阳性检出率很低，用于对患者确定诊断时是不合格的标本。所以，当病人初次留痰即为唾液时，应嘱病人重送并指导病人如何留取合格标本。
　　3、痰标本采集时间：根据痰标本的采集时间，将痰标本分为三类：
　　（1）即时痰病人就诊时深呼吸后咳出的痰液。应确保每个初次就诊病人均留取即时痰进行检查。
　　（2）晨痰患者晨起立即用清水漱口后，咳出的第2口和第3口痰液。
　　（3）夜间痰送痰前一日，患者晚间咳出的痰液。
　　（二）痰涂片制作
　　1、在进行痰涂片检查前对新的玻片用95%的乙醇擦拭（或浸泡）脱脂，经干燥、清洁、检查无油污、无划痕后作为合格的玻片备用。在已经准备的痰玻片背面左端的1/3处注明编号（如使用的载玻片一端无磨砂面，使用玻璃刻刀注明编号；如使用的载玻片一端有磨砂面，可使用2B铅笔在磨砂面上直接书写）。
　　2、小心打开痰标本盒，防止产生气溶胶或使标本外溢。仔细观察标本，使用折断的竹签茬端，挑取痰标本中干酪样、脓样或可疑部分约0.05～0.1ml，于玻片正面右侧2/3处，均匀涂抹成10×20mm的卵圆形痰膜。痰膜朝上静置自然干燥后（一般约需要30分钟）进行染色镜检。当气温低，痰膜不易干燥时，严禁将玻片直接在火焰上烘拷，以防产生气溶胶或痰膜脱落。一张载玻片上只能涂抹一份痰标本，一张载玻片只能使用一次，不得清洗后再次用于痰涂片染色检查。
　　3、涂抹完毕后的痰标本，在检查结果报告前，应暂时保留。以备涂片、染色不合格影响镜检结果时，重新涂片和染色之用。
　　（三）萋－尼氏染色
　　1、涂片自然干燥后，放置在染色架上，玻片间距保持在10mm以上的距离；火焰固定（在5秒钟内将玻片置于火焰上来回烘烤4次）。
　　2、滴加石碳酸复红染液，盖满痰膜，火焰加热至出现蒸汽后，脱离火焰，保持染色5分钟。染色期间应始终保持痰膜被染色液覆盖，必要时可续加染色液。加温时勿使染色液沸腾。
　　3、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去染色液，沥去标本上剩余的水。
　　4、自痰膜上端外缘滴加脱色剂布满痰膜，脱色1分钟；如有必要，需流水洗去脱色液后，再次脱色至痰膜无可视红色为止。
　　5、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去脱色液，沥去玻片上剩余的水。
　　6、滴加亚甲蓝复染液，染色30秒钟。
　　7、流水自玻片一端轻缓冲洗，冲去复染液，沥去标本上剩余的水。待玻片干燥后镜检。
　　一张染色合格的痰玻片，由于被亚甲蓝染色而呈亮蓝色。将染色后的玻片放置在报纸上，如果报纸上的文字透过痰膜不能被看清，表明该玻片涂抹过厚。
　　（四）显微镜检查
　　1、使用10倍目镜双目显微镜读片。
　　2、取染色完毕且已干燥的玻片，痰膜向上放置在玻片台上并以卡尺固定。首先使用40倍物镜，转动卡尺移动玻片至痰膜左端，将光线调节至适当亮度，调节焦距至可见细胞形态；移开40倍物镜，在玻片上滴1～2滴镜油，使用100倍油镜进行细致观察。在淡蓝色的背景下，抗酸菌呈红色，其他细菌和细胞呈蓝色。为防止抗酸杆菌的交叉污染，严禁镜头直接接触玻片上的痰膜。

第 [1] [2] [3] [4] [5] [6] [7] 页 共[8]页