主种子批和工作种子批应进行下列检定。
2.1.3.1 形态特征
革兰氏阳性球菌，直径0.5～1.0μm，成葡萄串状排列。
2.1.3.2 培养特性
在血琼脂或其它适宜培养基的平板培养基上，35℃培养18～36小时，长成直径1.0～2.0mm圆形隆起，表面光滑湿润，边缘整齐的金黄色菌落，菌落周围有大而透明的溶血环；肉汤培养物呈混浊生长，底部有沉淀。
2.1.3.3 生化反应
在糖类发酵培养基中生长18～24小时后，发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇和蔗糖，产酸不产气，不发酵阿拉伯糖和木糖，能产生血浆凝固酶。
2.1.3.4 血清学凝集试验
用抗血清作定量凝集试验，其凝集效价应不低于血清原效价之半。
2.1.3.5 毒力试验
肉汤培养物用生理氯化钠溶液稀释成5个不同浓度稀释液，每个浓度用体重18～20g小鼠5只，每只腹腔注射1.0ml，观察3天，记录小鼠死亡情况，计算LD50，1个LD50的菌数应小于1.5×109。
2.1.3.6 抗原性试验
选体重2.0～2.5Kg健康家兔3只，先腹腔注射3次，然后静脉注射3次，每次注射剂量分别为含菌1.0×1010/ml不含防腐剂的死菌悬液（可用0.6%福尔马林37℃作用7天杀菌兼脱毒；或加热杀菌）1、2、4、6、8、10ml，每次间隔3天，末次注射后12天采血做定量凝集试验，2/3家兔血清之凝集效价应达1∶800（＋）。
2.2 原液制备
2.2.1 生产用种子
工作种子批菌种启开后，转种肉汤，35℃培养18～36小时，经菌形、纯度检查合格后，作为生产用种子液。
2.2.2 培养基
采用经国家药品监督管理部门批准的培养基。
2.2.3 培养
用18～36小时生长良好的种子液，接种于生产用培养基中，35℃培养20～24小时。
2.2.4 纯菌检查
取生长对数期后期每瓶或罐培养物，涂片革兰氏染色镜检；接种血琼脂平板，35℃18～24小时培养。有杂菌生长者废弃。
2.2.5 培养液合并
经纯菌检查合格的培养液进行合并。
2.2.6 除菌过滤
合并的培养液最后用0.22μm滤膜除菌过滤。此滤液即为原液。
2.2.7 原液检定
按3.1项进行。
2.2.8 原液的保存及有效期
原液置2～8℃保存，保存期为3个月，超过3个月应重新进行无菌检查。
2.3 半成品配制
2.3.1 配制
用氯化钠调至等渗浓度，调pH值至6.0～7.5，肠毒素C含量为5～20ng/ml。
2.3.2 半成品检定
按3.2项进行。
2.4 成品制备
2.4.1 分批
按本版规程通则《生物制品分批规程》进行。
2.4.2 分装
按本版规程通则《生物制品分装规程》进行。
2.4.3 规格
每支装量为2ml，肠毒素C含量应为5～20ng/ml。
2.4.4 包装
按本版规程通则《生物制品包装规程》进行。
3 检定
3.1 原液检定
3.1.1 肠毒素C含量测定
按附录1法测定。含量应不低于5ng/ml。
3.1.2 总蛋白含量
按本版规程附录蛋白含量Lowry法测定，含量应不低于800μg/ml。
3.1.3 无菌试验
按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》A项进行，应符合规定。
3.2 半成品检定
3.2.1 渗透压比值
与0.9%生理氯化钠溶液的渗透压比值应为1.00±0.05。
3.2.2 无菌试验
按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》A项进行，应符合规定。
3.2.3 pH值
应为6.0～7.5。
3.3 成品检定
3.3.1 鉴别试验
按附录1法进行，结果应呈阳性，即供试品孔与对照孔的吸光度值比应不低于2。
3.3.2 外观
本品为淡黄色或无色液体，无沉淀、无异物。
3.3.3 pH值
应为6.0～7.5。
3.3.4 渗透压比值
同3.2.1项。
3.3.5 肠毒素C含量测定
按附录1法测定。含量应为5～20ng/ml。
3.3.6 T淋巴细胞增殖试验
按附录2法进行。增殖指数应不低于1.5。
3.3.7 无菌试验
按本版规程通则《生物制品无菌试验规程》A项进行，应符合规定。
3.3.8 异常毒性试验
按本版规程通则《生物制品异常毒性试验规程》进行，应符合规定。
3.3.9 热原质试验
按本版规程通则《生物制品热原质试验规程进行》，注射剂量按家兔体重每1kg注射1.0ml，应符合规定。
3.3.10 过敏试验
取体重250～350g豚鼠6只，连续3次隔日腹腔注射本品0.5ml，分别于第一次注射后第14天及第21天静脉注射本品1.0ml，每次3只，在注射后30分钟内观察动物，不得有连续干咳、痉挛、休克、死亡等过敏症状，24小时内不得出现死亡。
4 保存、运输及有效期
于2～8℃避光保存和运输，自分装之日起有效期为2年。
5 使用说明
根据国家药品管理当局批准的内容及本版规程通则《生物制品包装规程》编写。
6 附录
附录1 肠毒素C含量测定法
附录2 T淋巴细胞增殖试验
附录1 肠毒素C含量测定法(ELISA法)
本法采用酶联免疫法测定金黄色葡萄球菌滤液中肠毒素C含量。
1 试剂
